认识真菌荧光染色技术，从原理及技术方法开始

　　真菌荧光染色技术被广泛应用于真菌识别、病原体检测等领域，其实现了对真菌体内结构和代谢产物的可视化观察。本文旨在介绍真菌荧光染色技术的原理和方法。
 

　　一、技术原理
 

　　该技术主要是以真菌体内含有的荧光染料进行染色，从而使真菌细胞产生荧光，达到观察和检测的目的。真菌体内含有的荧光染料主要有：伯克霍尔德胺(Berkeley’s acid)、quinacrine等。
 

　　该技术的原理是利用荧光显微镜(fluorescence microscope)对生物样本中含有的荧光物质进行成像。荧光显微镜是一种将激发光经过标本后发射出的荧光光子转化为图像的高精度仪器。
 

　　二、技术方法
 

　　1.准备荧光染料
 

　　通常使用的真菌荧光染料是quinacrine或伯克霍尔德胺(Berkeley’s acid)，其中quinacrine和伯克霍尔德胺都是吸附在真菌细胞壁和细胞内膜上的荧光物质。
 

　　2.制备荧光染色液
 

　　将荧光染料溶解在染色液中，将染料均匀分布于液体中。
 

　　3.准备真菌样本
 

　　真菌样本可以通过培养真菌或从感染患者中获取。真菌样本需要先进行标本加热处理，以杀死非真菌微生物，然后进行固定处理，并在亚甲基蓝(methyl blue)溶液中处理，以防止染色液进入细胞中。
 

　　4.将染色液滴于真菌样本上
 

　　将制备好的荧光染色液滴于真菌样本上，并在一定时间内进行颜色反应和染色作用。
 

　　5.利用荧光显微镜进行观察
 

　　用荧光显微镜观察染色后的样本，荧光染料的荧光信号可以被染色细胞表现出来。
 

　　真菌荧光染色技术是一种重要的生物学研究技术，可应用于真菌识别、病原体检测、药物研发等领域。该技术通过染色作用将真菌样本中的荧光染料标记成荧光信号，用荧光显微镜观察真菌结构和代谢产物的分布位置和数量，从而实现对真菌体内结构和代谢产物的可视化观察。